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대한민국약전 일반시험법

[일반시험법] 크로마토그래프법

by 달행남 (달리는 행운남) 2021. 5. 14.
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일반시험실에서 적용하는 크로마토그래프법에 대해 간단히 알아보고자 합니다.

 

▶정

 

크로마토그래프법 : 시험에 알맞은 고정상(Stationary phase)을 사용하여 이동상(Mobile phase)을 지나가게 하여 혼합되어 있는 물질을 정밀하게 분리하여 분석하는 방법이다.

박층크로마토그래피 예시(출처 : 위키피디아)

 

 

예시를 들어보자면 다음과 같다.
볼펜으로 종이 아랫부분에 검은 점을 찍고 점 아랫부분 종이를 약간의 물에 적셔 담그면, 물이 천천히 위로 올라가 (종이가 적셔지면서)검은 점을 지나가게 되고, 검은점의 색이 물을 따라 올라가면서 여러 가지 색으로 나뉜다.

 

 

예시(네이버 블로그 검색)

 

 


여기서 이동상은 물, 고정상은 종이, 분석하는 물질은 볼펜으로 찍은 검은 점이라 할 수 있다.
시험 결과는 검은 점이 종이에 퍼지면서 여러 색(성분)으로 나뉜 것을 확인함으로써 하나의 검은 점이 여러 물질로 이루어져(혼합되어) 있는 것을 확인할 수 있다.

 

 

액체크로마토그래피

 

 

여기서 이동상을 액체(Liquid)를 쓰면 액체크로마토그래피, 기체(Gas)를 쓰면 기체크로마토그래피, 이온(Ion)을 쓰면 이온크로마토그래피, 얇은 판(Thin layer)을 쓰면 박층 크로마토그래피라 할 수 있다.

 

 

기체크로마토그래피

 

 

기기로 분석하는 크로마토그래프법은 검출기의 신호에 따라 아래와 같은 크로마토그램이 그려지는 데 가로축(x축)을 시간(Run time), 세로축(y축)을 분석시간(유지시간)이라 이라 하며 아래그림과 같이 검출기의 신호를 받아 Y축이 올라갔다 내려올 때를 흔히 Peak라 부르며, 분석하고자 하는 성분을 확인할 수 있다.

 

 

크로마토그램의 피크 예시

 

아래에는 실험실에서 흔히 사용하는 크로마토그래프법에 대해 간단히 정리해보도록 하겠다.

 

 

액체크로마토그래프법(HPLC Method)

 

[일반시험법]액체크로마토그래프법(HPLC Method)

액체크로마토그래프법은 적당한 고정상을 써서 만든 칼럼에 검체를 주입하고, 이동상을 액체를 사용하여 고정상에 대한 유지력의 차를 이용해 각각의 성분으로 분리하여 분석하는 방법이다.

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기체크로마토그래프법(GC Method)

 

[일반시험법]기체크로마토그래프법(GC Method)

기체크로마토그래프법은 적당한 고정상을 써서 만든 칼럼에 검체를 주입하고, 이동상으로 불활성기체(운반 기체:Carrier Gas)를 사용하여 고정상에 대한 유지력의 차를 이용해 각각의 성분으로 분

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박층크로마토그래프법(TLC Method)

 

[일반시험법]박층크로마토그래프법(Thin Layer Chromatography)

박층크로마토그래프법은 적당한 고정상으로 만든 박층(薄層, 얇은 층)을 써서 혼합물을 이동상으로 전개하여 각각의 성분으로 분리하는 방법이며 물질의 확인 또는 순도시험 등에 쓴다. 박층판

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